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拯救“二師兄”,從選擇核酸提取方法開始

更新日期:2019年5月6日 大字 小字

導讀

自去年爆發(fā)非洲豬瘟疫情以來,全國各地發(fā)生了近百起豬瘟疫情,豬場養(yǎng)殖戶損失慘重,人心惶惶。







在各級政府和科研力量的輔助下,整體疫情發(fā)生勢頭逐漸平緩,但由于病毒有較強的潛伏期,尚未研發(fā)出有效疫苗,形式依然嚴峻,不可掉以輕心。


目前病原檢測可通過雙抗夾心Elisa、PCR、熒光定量PCR等檢測方法;



核酸提取方法會影響PCR產物效率,跟隨小寶來看看不同核酸提取方法有哪些差異吧。

柱離心法


原理是柱由特殊硅基質吸附材料構成,可特異性結合DNA,其余蛋白質等雜質因不被吸附而去除了,過程中需與離心機配合使用,提取得到的核酸純度有一定保障,但耗樣量較大,反復工作對大通量檢測不友好。




磁珠吸附法


磁珠吸附法又分為磁棒法和抽吸法,前者根據利用具有磁性且對核酸特異性吸附的磁珠的轉移控制提取進程;



后者則是通過添加或抽取液體,由于在不同步驟轉換中,抽取操作需要非常謹慎,不然試管內的裂解液或者緩沖液殘留,存在核酸純度不高的風險。


磁棒法具備較強的優(yōu)勢,可將豬的組織樣本經研磨后,離心取上清液;血液經離心后取血漿;口腔或肛拭子加入生理鹽水經漩渦振蕩、離心后取上清液,用于提取純化核酸。



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