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拯救“二師兄”,從選擇核酸提取方法開始

更新日期:2019年5月6日 大字 小字

導(dǎo)讀

自去年爆發(fā)非洲豬瘟疫情以來,全國各地發(fā)生了近百起豬瘟疫情,豬場養(yǎng)殖戶損失慘重,人心惶惶。







在各級政府和科研力量的輔助下,整體疫情發(fā)生勢頭逐漸平緩,但由于病毒有較強(qiáng)的潛伏期,尚未研發(fā)出有效疫苗,形式依然嚴(yán)峻,不可掉以輕心。


目前病原檢測可通過雙抗夾心Elisa、PCR、熒光定量PCR等檢測方法;



核酸提取方法會(huì)影響PCR產(chǎn)物效率,跟隨小寶來看看不同核酸提取方法有哪些差異吧。

柱離心法


原理是柱由特殊硅基質(zhì)吸附材料構(gòu)成,可特異性結(jié)合DNA,其余蛋白質(zhì)等雜質(zhì)因不被吸附而去除了,過程中需與離心機(jī)配合使用,提取得到的核酸純度有一定保障,但耗樣量較大,反復(fù)工作對大通量檢測不友好。




磁珠吸附法


磁珠吸附法又分為磁棒法和抽吸法,前者根據(jù)利用具有磁性且對核酸特異性吸附的磁珠的轉(zhuǎn)移控制提取進(jìn)程;



后者則是通過添加或抽取液體,由于在不同步驟轉(zhuǎn)換中,抽取操作需要非常謹(jǐn)慎,不然試管內(nèi)的裂解液或者緩沖液殘留,存在核酸純度不高的風(fēng)險(xiǎn)。


磁棒法具備較強(qiáng)的優(yōu)勢,可將豬的組織樣本經(jīng)研磨后,離心取上清液;血液經(jīng)離心后取血漿;口腔或肛拭子加入生理鹽水經(jīng)漩渦振蕩、離心后取上清液,用于提取純化核酸。



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