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技術(shù)文章

基因擴(kuò)增PCR如何規(guī)范的操作及做好保養(yǎng)

更新日期:2019年4月8日 大字 小字
基因擴(kuò)增PCR可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn),通常應(yīng)經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,若實(shí)驗(yàn)工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過(guò)程。

基因擴(kuò)增PCR規(guī)范的操作:
    (1)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的工作;
    (2)在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止污染的措施;
    (3)清潔工作及時(shí)、正確。實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后,必須立即對(duì)本區(qū)進(jìn)行清潔。除常規(guī)的消毒液體對(duì)表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線(xiàn)燈的照射消毒外,對(duì)一些實(shí)驗(yàn)設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理。

基因擴(kuò)增PCR的日常維護(hù)保養(yǎng)工作:
1、樣品池的清洗
先打開(kāi)蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。

2、熱蓋的清洗
對(duì)于熒光定量基因擴(kuò)增儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來(lái)自樣品池時(shí),或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí),需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無(wú)污物阻擋光路。

3、儀器外表面的清洗
清洗JS-G基因擴(kuò)增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達(dá)不到消毒的效果,選擇沒(méi)有腐蝕性的清洗劑對(duì)基因擴(kuò)增儀的外表面進(jìn)行清洗。

4、更換保險(xiǎn)絲
先將基因擴(kuò)增儀關(guān)機(jī),拔去插頭,打開(kāi)電源插口旁邊的保險(xiǎn)盒,換上備用的保險(xiǎn)絲,觀察是否恢復(fù)正常。
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