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技術(shù)文章

基因擴(kuò)增PCR如何規(guī)范的操作及做好保養(yǎng)

更新日期:2019年4月8日 大字 小字
基因擴(kuò)增PCR可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗,通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個實(shí)驗過程,若實(shí)驗工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過程。

基因擴(kuò)增PCR規(guī)范的操作:
    (1)臨床基因擴(kuò)增檢驗實(shí)驗室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗的工作;
    (2)在實(shí)驗操作過程中,操作者必須戴手套,并經(jīng)常更換。此外,操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施;
    (3)清潔工作及時、正確。實(shí)驗工作結(jié)束后,必須立即對本區(qū)進(jìn)行清潔。除常規(guī)的消毒液體對表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對一些實(shí)驗設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理。

基因擴(kuò)增PCR的日常維護(hù)保養(yǎng)工作:
1、樣品池的清洗
先打開蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。

2、熱蓋的清洗
對于熒光定量基因擴(kuò)增儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時,或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。

3、儀器外表面的清洗
清洗JS-G基因擴(kuò)增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達(dá)不到消毒的效果,選擇沒有腐蝕性的清洗劑對基因擴(kuò)增儀的外表面進(jìn)行清洗。

4、更換保險絲
先將基因擴(kuò)增儀關(guān)機(jī),拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀察是否恢復(fù)正常。
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