超微量分光光度計是現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)使用儀器，在生命科學實驗室應用廣泛，但是我們必須了解一下分光光度計的一些使用限制，這樣才不會出現(xiàn)失誤或者產(chǎn)生危險。

　　在說使用限制之前，我們先來了解一下超微量分光光度計的工作原理是物質(zhì)對光的選擇吸收和瑯伯-比爾定律。，超微量分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器，常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

　　論瑯伯-比爾定律的限制性條件：

　　其一：通過溶液的光必須是平行的；

　　其二：通過溶液的光必須是單色光；

　　其三：待測溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過高，這是瑯伯-比爾定律首要的三個前提條件。

　　在實際的分光光度計的制造和使用過程中這三個條件是不可能達到的：

　　其一：因為光是直線傳播的，在分光光度計制造過程中，燈源發(fā)出的光是發(fā)散的，經(jīng)過聚焦鏡進行聚焦等直到經(jīng)過溶液的整體過程中，光是不可能平行的。

　　其二：燈源發(fā)出的光是復合光，經(jīng)過狹縫，再經(jīng)過光柵分光等步驟，因為受到狹縫和光柵本身的限制，光柵分光不可能達到純單色光。還有光度計的整體設計問題，光度計不可能沒有其它的雜光存在。

　　其三：用戶的溶液也不可能是純凈的，也會含有一些雜質(zhì)，這些對光度的吸收都會存在影響。除以上三個方面的影響外，在實際的光度計應用過程中還會存在其他因素的影響，例如：

　　1、經(jīng)過比色皿的光是否垂直；

　　2、比色皿寬度是否為10mm的標準值；

　　3、測試波長是否準確；

　　4、程序設計是否存在漏洞等等，都會直接影響到利用瑯伯-比爾定律計算出的結(jié)果。

　　所以在日常的測試過程中，得出的結(jié)果和瑯伯-比爾定律有些偏差是很正常的，只是我們關(guān)注偏差多少的問題。

　　關(guān)于超微量分光光度計的使用限制就給大家介紹到這里了，更多超微量分光光度計資訊請繼續(xù)關(guān)注寶予德。