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技術(shù)文章

基因擴(kuò)增PCR的設(shè)計(jì)的核心問題是什么

更新日期:2019年5月28日 大字 小字
基因擴(kuò)增PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。在實(shí)際工作中,常見的有以下幾種污染類型:擴(kuò)增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一旦發(fā)生污染,實(shí)驗(yàn)就須停止,直到找到污染源為止,而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所以發(fā)生污染后再圍繞實(shí)驗(yàn)室來尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣,浪費(fèi)人力物力。因此要避免污染,首先應(yīng)是預(yù)防,而不是排除。

基因擴(kuò)增PCR的日常維護(hù)保養(yǎng)工作:
1、樣品池的清洗
先打開蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運(yùn)行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。

2、熱蓋的清洗
對(duì)于熒光定量基因擴(kuò)增儀,當(dāng)有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時(shí),或當(dāng)有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí),需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無污物阻擋光路。

3、儀器外表面的清洗
清洗JS-G基因擴(kuò)增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達(dá)不到消毒的效果,選擇沒有腐蝕性的清洗劑對(duì)基因擴(kuò)增儀的外表面進(jìn)行清洗。

4、更換保險(xiǎn)絲
先將基因擴(kuò)增儀關(guān)機(jī),拔去插頭,打開電源插口旁邊的保險(xiǎn)盒,換上備用的保險(xiǎn)絲,觀察是否恢復(fù)正常。
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